磁力柠檬（磁力柠檬）

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2019 年第 12 期科研与开发胶体金（colloidal gold）也称金溶胶，是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒大小多在 1耀100nm 之间，能够稳定地、均匀地、呈单一分散状态悬浮在胶体金溶液中 [ 1 ] 。胶体金具有胶体的多种特性，对电解质敏感，易被破坏水化层磁力柠檬，凝聚成大颗粒形成沉淀等。某些蛋白质等大分子物质有保护胶体金，加强其稳定性的作用 [ 2 ] 。利用胶体金与蛋白质的结合形成的溶液叫免疫金复合物，主要应用在免疫反应中检测抗原或抗体 [ 3,4 ] 。胶体金的制备方法有很多，多采用还原法。氯金酸（HAuCl 4 ）是主要还原材料，常用还原剂有鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等 [ 5 ] 。制备出的粒径较大，多在 1~20nm 之间，与蛋白结合形成免疫金后，在抗原或抗体检测中易出现稳定性差的现象。柠檬酸三钠是工业中常用的稳定剂，用其制备胶体金可增强其稳定性，因此本文将用柠檬酸三钠法制备胶体金，并对胶体金的应用进行检测。CA153 是乳腺癌重要的标志物之一，它与乳腺癌的诊断和预后有重要的关系 [ 6,7 ] 。本研究将 CA153 抗体包被在胶体金颗粒上，并对其稳定性进行检测。

研究建立的方法为胶体金临床检测应用奠定基础。1 实验部分1.1 材料与试剂氯 金 酸 （HAuCl 4 ）， 柠 檬 酸 三 钠 （Sigma -ALDRICH）；CA153 标准品 （Abnova 公司）；CA153抗体（爱必信上海生物科技有限公司）；硝酸纤维素膜，酪蛋白，PVP-10，海藻糖（北京博奥拓达科技有限公司）；Tris-base，BSA（德国 BioFrox）；EDTA（天津瑞金特化学品有限公司）；H 3 BO 3 （天津市恒兴化学试剂制造有限公司）；蔗糖（西陇化工股份有限公司）。1.2 实验仪器HDM-500 磁力搅拌加热套（金坛市杰瑞尔电器有限公司）；H-2050R 离心机（湖南湘仪实验仪器开发有限公司）；T6 紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司），GFL-45 恒温鼓风干燥箱（天津市莱玻特瑞仪器设备有限公司 ）。曹涤非，薛佳莹，崔向红，黄国庆，王 雷（黑龙江省科学院 高技术研究院，黑龙江 哈尔滨 150020）摘 要：本文研究了柠檬酸三钠法制备胶体金的最适条件，并确定了 CA153 抗体包被胶体金的最适条件，制备出稳定的 CA153 抗体包被的胶体金。

实验结果显示，胶体金最适制备条件为 1%柠檬酸三钠加入量为16mL·L -1 0.01%氯金酸（HAuCl 4 ），沸腾时间为 10min。免疫金的最适制备条件是 pH 值为 9.0，CA153 抗体加入量 25.0滋g·mL -1 。上述条件制备的免疫金稳定性好，线性度高。关键词：胶体金；柠檬酸三钠；CA153中图分类号：O69 文献标识码：APreparation and application of colloidal gold by trisodium citrate *CAO Di-fei, XUE Jia-ying, CUI Xiang-hong, HUANG Guo-qing, WANG Lei（Institute of Advanced Technology, Heilongjiang Academy of Sciences, Harbin 150020, China）Abstract:The method of preparing colloidal gold by sodium citrate is studied for definition of the reactioncondition. The optimum method for coating colloidal gold with CA153 antibody is determined to prepare stable im原munogold. The result showed that the addition amount of 1% Sodium Citrate is 16ml·L -1 HAuCl 4 . The optimum val原ue of pH is 9.0 for preparation of immunogold. The addition amount of CA153 antibody is 25.0滋g·mL -1 . The im原munogold prepared under the above condition has good stability and high linearity.Key words:colloidal gold；sodium citrate；CA153DOI：10.16247/ki.23-1171/tq.20191212收稿日期：2019-09-06基金项目：黑龙江省院所基本应用技术研究专项（ZNJZ2017GJS01）作者简介：曹涤非（1981-），女磁力柠檬，副研究员，博士，研究方向：肿瘤分子生物学。Sum 291 No. 12化 学 工 程 师Chemical Engineer 2019 年第 12 期